Angiogenesis inhibition by green propolis and the angiogenic effect of L-lysine on bladder cancer in rats / Inibição da angiogênese pela própolis verde e efeito angiogênico da L-lisina no câncer de bexiga em ratos

PURPOSE: To determine the effects of water-soluble derivative of green propolis in bladder cancer angiogenesis in rats given N-butyl-(-4-hydroxybutyl) nitrosamine (BBN). METHODS: Nine groups were established, where six of them (Groups 1 to 6), the animals received 0.05% BBN in their drinking water for 14 weeks. From the 32nd to the 40th week, Groups 1, 2, 3 and 4 were treated respectively with water, L-lysine (300 mg/kg/day), celecoxib (30 mg/kg/day) and propolis (300 mg/kg/day). Groups 5 and 6 were given propolis and L-lysine from the 1st to the 40th week (150 mg/kg/day). Microvascular density was determined by histological sections stained for the marker CD-31 and analyzed with specific software. RESULTS: The microvascular density in bladder carcinomas was lower (p<0.01) in rats receiving propolis than in controls given carcinogen only. On the other hand, the microvascular density of tumors in rats receiving carcinogen and L-lysine for 40 weeks from the beginning of carcinogen treatment was significantly higher (p<0.01) than in the corresponding controls. CONCLUSION: Water-soluble derivative of propolis inhibits angiogenesis in BBN-induced rat bladder cancer, while L-lysine treatment stimulates angiogenesis if initiated concurrently with BBN.

OBJETIVO: Determinar os efeitos da própolis verde solúvel em água na angiogênese de câncer de bexiga em ratos que receberam n-butil-(-4-hidroxibutil) nitrosamina (BBN). METODOS: Nove grupos foram estabelecidos, onde em seis destes (grupos de 1 a 6) os animais receberam BBN a 0,05% em água de beber por 14 semanas. Na 32ª semana das 40 semanas, os grupos 1, 2, 3 e 4 foram tratados respectivamente com água, L lisina (300 mg/kg/dia), celecoxibe (30 mg/kg/dia) e própolis (300 mg/kg/dia). Os grupos 5 e 6 receberam própolis e L lisina da 1ª a 40ª semana (150 mg/ kg/dia). A densidade microvascular foi determinada por cortes histológicos corados pelo CD-31 e analisados por programa de computador específico. RESULTADOS: A densidade microvascular em carcinomas de bexiga foi menor com p<0,01 nos ratos que receberam própolis do que nos carcinomas do grupo controle que recebeu apenas carcinógeno. Por outro lado, a densidade microvascular de tumores de ratos que receberam carcinógeno e L-Lisina por 40 semanas desde o início do carcinógeno foi significantemente maior com p<0,01 que a densidade microvascular dos tumores de seu respectivo grupo controle. CONCLUSÃO: A própolis verde solúvel em água inibiu a angiogênese em câncer de bexiga induzido pelo BBN, enquanto a L- lisina estimulou a angiogênese quando iniciada juntamente com o BBN.

Immunoexpression of tumor suppressor genes p53, p21WAF1/CIP1 and p27KIP1 in humam astrocystic tumors

The aim of the present study was to evaluate the tumor suppressor genes p53, p21WAF1/CIP1 and p27KIP1 expression in astrocytic tumors, correlating the findings with the histopathological grade (WHO). An immunohistochemical study of the p53, p21 and p27 proteins using the streptavidin-biotin-peroxidase method was performed in fifty-five astrocytomas (13 grade I, 14 grade II, 7 grade III and 21 grade IV) and five samples of non-tumor brain tissue (negative control). p53 positive indices (PI) and labeling indices (LI) showed tendency to increase according to malignant progression. The nuclear expression of p27 presented similar inclination, except for the PI reduction verified in grade IV tumors. Otherwise, the cytoplasmic p27 staining was more evident between high-grade tumors (III and IV). p53 and nuclear p27 expression was correlated with the histological classification (p<0.01; test H). On the other hand, p21 indices revealed a propensity to reduction in agreement with malignant evolution of the astrocytic tumors, except for high scores observed in grade IV tumors. The non-tumor samples did not show any expression of these proteins. These results indicated the p53 mutation as an initial, relevant and potentially predictor of tumor progression event in astrocytomas, with the detection of p21 protein as an important resource for the deduction of functional situation of this gene. Moreover, the activation of p27KIP1 was preserved in the astrocytic tumors and its cytoplasmic manifestation seems to be resultant of its nuclear expression, not demonstrating a direct impact in astrocytomas tumorigenesis.

O presente estudo objetivou avaliar a expressão dos supressores tumorais p53, p21WAF1/CIP1 e p27KIP1 em tumores astrocíticos humanos, correlacionando os achados com a graduação histopatológica (OMS). Procedeu-se o estudo imuno-histoquímico para as proteínas p53, p21 e p27 utilizando o método da estreptavidina-biotina-peroxidase em 55 astrocitomas (13 do grau I, 14 do grau II, 7 do grau III e 21 do grau IV) e 5 amostras de tecido cerebral não-tumoral (controle negativo). Os índices de positividade (PI) e de marcação (LI) para p53 demonstraram tendência de aumento conforme a progressão maligna. A expressão nuclear do p27 apresentou semelhante inclinação, exceto pela redução do PI verificada nos tumores do grau IV. Já a marcação citoplasmática do p27 foi mais evidente entre tumores de alto grau (III e IV). As expressões de p53 e p27 nuclear demonstraram correlação com a classificação histológica (p<0,01; teste H). Por outro lado, os índices para p21 manifestaram propensão à redução conforme a evolução maligna dos tumores astrocíticos, salvo significante aumento observado nos tumores do grau IV. Não houve expressão dessas proteínas nas amostras não-tumorais. Tais resultados indicaram a mutação do p53 como um evento inicial, relevante e potencialmente indicador de progressão maligna nos astrocitomas, sendo a detecção da proteína p21 um importante recurso para a dedução da situação funcional desse gene. Além disso, a ativação do p27KIP1 mostrou-se preservada nos tumores astrocíticos e sua manifestação citoplasmática parece ser reflexo de sua expressão nuclear, não demonstrando impacto direto na tumorigênese dos astrocitomas.

Ketone bodies metabolism during ischemic and reperfusion brain injuries following bilateral occlusion of common carotid arteries in rats

PURPOSE: To evaluate the in vivo alterations on ketone bodies metabolism after cerebral ischemia/reperfusion through an experimental model of brain ischemia induced by simple occlusion of common carotid arteries (CCAs) in Wistar rats. METHODS: Forty-eight male Wistar rats were randomly distributed on two groups (S - Sham; T - Test) and further redistributed into four times sets of study. After bilateral occlusion of CCAs for 30min, the animals of group T were allowed reperfusion for 0, 5, 10 and 15min. Samples of cerebral tissue and systemic arterial blood were collected and the metabolites acetoacetate (ACT) and beta-hydroxybutyrate (BHB) were determined. RESULTS: Cerebral ACT and BHB levels increased significantly in Group T after 30min of carotid occlusion (time 0). The highest brain ketone bodies (ACT+BHB) concentration was verified at 5min of reperfusion, decreasing after 10min of recirculation. Systemic ketone bodies levels increased similarly between test and sham groups. Group S demonstrated a significant increase in cerebral and systemic ACT and BHB concentrations mainly after 40-45min of study. CONCLUSIONS: The partial transient acute global brain ischemia induced by the bilateral carotid occlusion in Wistar rats triggered ketogenesis probably due to a central stimulation of catecholamine secretion. There was an increased cerebral uptake of ketone bodies following brain ischemia, reaffirming these metabolites as alternative energy substrates under conditions of cerebral metabolic stress as well as its potential role on neuroprotection. The greatest changes in ketone bodies metabolism were verified at initial minutes of recirculation as a result of the reperfusion injury phenomenon.

OBJETIVO: Avaliar as alterações in vivo no metabolismo dos corpos cetônicos após isquemia/reperfusão cerebral através de um modelo experimental de isquemia cerebral induzido pela simples oclusão das artérias carótidas comuns (CCAs) em ratos Wistar. MÉTODOS: Quarenta e oito ratos Wistar machos foram distribuídos aleatoriamente em dois grupos (S - Controle; T - Teste) e cada um deles redistribuídos em quatro tempos de estudos. Após oclusão bilateral das CCAs por 30min, permitiu-se reperfusão aos animais do grupo T nos tempos 0, 5, 10 e 15min. Foram coletadas amostras de tecido cerebral e sangue arterial sistêmico e quantificados os metabólitos acetoacetato (ACT) e beta-hidroxibutirato (BHB). RESULTADOS: Os níveis cerebrais de ACT e BHB aumentaram significantemente no Grupo T após 30min de oclusão carotídea (tempo 0). A maior concentração de corpos cetônicos (ACT+BHB) foi verificada aos 5min de reperfusão, diminuindo após 10min de recirculação. Os níveis de corpos cetônicos sistêmicos aumentaram de modo semelhante entre os grupos teste e controle. O Grupo S demonstrou significante aumento nas concentrações sistêmicas e cerebrais de ACT e BHB principalmente após 40-45min de estudo. CONCLUSÕES: A isquemia cerebral aguda transitória e parcial induzida pela oclusão bilateral das carótidas em ratos Wistar ativou a cetogênese provavelmente devido à estimulação central da secreção de catecolaminas. Houve um aumento da captação dos corpos cetônicos após isquemia cerebral, reafirmando esses metabólitos como substratos energéticos alternativos em condições de estresse metabólico cerebral, bem como suas potencialidades na neuroproteção. As maiores alterações no metabolismo dos corpos cetônicos foram verificadas nos minutos iniciais de recirculação como resultado do fenômeno da lesão de reperfusão.

Estratégias auxiliares para graduação dos tumores astrocíticos segundo os critérios histopatológicos estabelecidos pela OMS / Auxiliary strategies for astrocytic tumor graduation according to histopathological criteria established by WHO

INTRODUÇÃO: Apesar das recentes descobertas acerca das alterações moleculares envolvidas na tumorigênese dos astrocitomas, a análise histológica convencional permanece o melhor método diagnóstico e razoável indicador prognóstico dos tumores astrocíticos. Todavia, a rotina histopatológica preconizada pela Organização Mundial da Saúde (OMS) mostra-se laboriosa, sendo marcada pela baixa reprodutibilidade. OBJETIVO: O presente estudo objetivou desenvolver estratégias auxiliares para graduação dos tumores astrocíticos a partir dos critérios histológicos estabelecidos pela OMS. MATERIAL E MÉTODO: Procedeu-se à análise clínico-epidemiológica e à reavaliação histopatológica de 55 astrocitomas de diferentes gradações (13 grau I, 14 grau II, sete grau III e 21 grau IV) e de cinco amostras de tecido cerebral não-tumoral (grupo controle). RESULTADOS: A distribuição por idade, por sexo e pela localização tumoral dos portadores dessas neoplasias reproduziu, de um modo geral, as tendências mundiais. A presença de células gigantes multinucleadas e de gemistócitos foi associada à malignidade tumoral. Os achados histopatológicos avaliados segundo critérios semiquantitativos e pelo modelo de aprendizagem CART confirmaram a gradação original, reiterando a aplicabilidade e a reprodutibilidade dos mesmos. CONCLUSÃO: Tais resultados indicaram a árvore de decisão CART e o somatório de escores semiquantitativos como estratégias práticas e auxiliares para a graduação dos astrocitomas segundo os critérios da OMS.

BACKGROUND: Despite recent discoveries concerning molecular alterations involved in astrocytoma tumorigenesis, the conventional histological analysis remains the best diagnostic method and a reasonable prognostic indicator for astrocytic tumors. However, the histopathological routine recommended by the World Health Organization (WHO) is laborious and marked by low reproducibility. OBJECTIVE: The present study aimed to develop auxiliary strategies for astrocytic tumor graduation according to histological criteria established by WHO. MATERIAL AND METHOD: A clinical and epidemiological analysis and a histopathological evaluation were performed in 55 astrocytomas of different graduations (13 grade I, 14 grade II, seven grade III, 21 grade IV) and five samples of non-tumor tissue (control group). RESULTS: The distribution by age, sex, and tumor localization of astrocytomas in patients reproduced, in a general way, worldwide trends. The presence of multinucleated cells and gemistocytes was associated with tumoral malignancy. The histopathological findings evaluated through semi-quantitative criteria and CART modeling confirmed the primary classification, reaffirming their applicability and reproducibility. CONCLUSION: These results indicate the CART decision tree and the totality of semi-quantitative scores as practical and auxiliary strategies for astrocytoma graduation as stated by WHO criteria.

Expressão das proteínas BCL-2 e BAX em tumores astrocíticos humanos / Expression of BCL-2 and BAX proteins in human astrocytic tumors

INTRODUÇÃO: Os astrocitomas constituem os mais freqüentes tumores primários do sistema nervoso central (SNC). Admite-se que parte do crescimento tumoral seja resultante da inibição da morte celular programada: a apoptose. Tal fenômeno é basicamente regulado pelo equilíbrio entre moléculas antiapoptóticas (ex.: B-cell lymphoma protein 2 [BCL-2]) e pró-apoptóticas (ex.: BCL-2 associated protein X [BAX]). OBJETIVO: O presente estudo objetivou avaliar a expressão de BCL-2 e BAX em tumores astrocíticos humanos. MATERIAL E MÉTODOS: Procedeu-se ao estudo imuno-histoquímico dessas proteínas utilizando-se o método da avidina-biotina-peroxidase em 55 astrocitomas (13 do grau I, 14 do II, sete do III e 21 do grau IV) e cinco amostras de tecido cerebral não-tumoral (grupo controle). RESULTADOS: Os índices de positividade para BCL-2 e BAX demonstraram propensão ao acréscimo, de acordo com a gradação tumoral, com positividade geral de 43,26 por cento e 24,67 por cento, respectivamente. Essas proteínas não foram detectadas entre os espécimes não-tumorais. Os escores de marcação para BCL-2 apresentaram tendência ao aumento conforme a progressão histológica, enquanto os para BAX mostraram-se semelhantes nas diversas graduações. A análise conjunta dessas proteínas demonstrou significativa correlação com a gradação tumoral (p < 0,05; teste H), sendo mais evidente nos glioblastomas (grau IV) em comparação com os astrocitomas de baixo grau (I e II) (p < 0,05; teste U). A relação BCL-2/BAX indicou o aumento da orientação à sobrevida celular dos tumores astrocíticos de acordo com a progressão maligna. CONCLUSÕES: Tais resultados indicam as alterações na expressão das proteínas BCL-2 e BAX como resultantes do processo tumorigênico nos astrocitomas, com o crescente predomínio do perfil antiapoptótico de acordo com a transformação maligna. Nesse sentido, sugere-se que a superexpressão de BCL-2 nos tumores astrocíticos possa ser indicativa de fenótipos mais agressivos, ...

BACKGROUND: Astrocytomas represent the most frequent primary tumors of the central nervous system. Admittedly, part of tumor growth is due to inhibition of programmed cell death: the apoptosis. This phenomenon is basically regulated by the balance between anti-apoptotic (e.g.: B-cell lymphoma protein 2 [BCL-2]) and pro-apoptotic (e.g.: BCL-2 associated protein X [BAX]) molecules. OBJECTIVE: The present study aimed to evaluate the expression of BCL-2 and BAX in human astrocytic tumors of different histopathological grades. MATERIAL AND METHOD: An immunohistochemical study of those proteins using the avidin-biotin-peroxidase method was performed in 55 astrocytomas (13 grade I, 14 grade II, seven grade III and 21 grade IV) and five samples of non-tumor brain tissue (control group). RESULTS: The BCL-2 and BAX positive indices tended to increase according to astrocytomas graduation, with general positivity of 43.26 percent and 24.67 percent, respectively. These proteins were not detected among non-tumor specimens. BCL-2 labeling scores demonstrated a tendency to increase in accordance with histopathological advancing, while BAX values were similar in all graduations. The combined analyses of these proteins expression presents a significant correlation with tumor grade (p < 0.05; H test), witch is more evident among glioblastomas (grade IV) in comparison with low-grade astrocytomas (I and II) (p < 0.05; U test). BCL-2/BAX ratio denoted increasing of cellular survival orientation of the astrocytic tumors according to malignant progression. CONCLUSIONS: The results indicate alterations in BCL-2 and BAX proteins expression as resultant of the tumorigenic process in astrocytomas, with increasing predominance of the anti-apoptotic profile in consonance of malignant transformation. In this way, we propose that BCL-2 overexpression in astrocytic tumors may be indicative of more aggressive phenotypes, furthermore configuring a potential therapeutic target.

Impacto do oncogene C-MYC no câncer / Impact of the C-MYC oncogene on cancer

O oncogene C-MYC tem sido apontado como peça central no processo tumorigênico em diversos cânceres humanos. Recentes evidências reforçam as participações direta e indireta da proteína C-MYC na regulação do ciclo celular, diferenciação, metabolismo, crescimento celular, apoptose, instabilidade genômica, imortalidade e angiogênese. Novos esforços estão sendo direcionados no sentido da identificação dos genes-alvo regulados pelo C-MYC e da elucidação dos mecanismos moleculares implicados na transformação neoplásica. O maior desafio, todavia, consiste no desenvolvimento de ferramentas capazes de modular a interação entre a proteína C-MYC e os seus alvos moleculares, desvendando potenciais estratégias terapêuticas. A presente revisão aborda aspectos gerais e peculiaridades quanto à ativação e à regulação do C-MYC, bem como discute os diversos programas celulares modulados pela proteína C-MYC.

Astrocitomas: uma revisão abrangente / Astrocyomas: a comprehensive review

A presente revisão aborda os atuais conceitos sobre a origem celular, a etiologia, aclassificação e a graduação dos astrocitomas. Os achados neuropatológicos característicos dos diferentes tipos de neoplasias astrocíticas são apresentados de acordo com o sistema adotado pela Organização Mundial da Saúde. Além disso, relata-se o presente estado da arte acerca da gen´stica molecular desses tumores. Após descrever o perfil epidemiológico e os aspectos clínicos gerais, a situação atual do tratamento multidisciplinar e as novas perspectivas terapêuticas para os astrocitomas são comentadas.

Avaliação metabólica das lesões de isquemia e reperfusão cerebrais após oclusão bilateral das artérias carótidas comuns: estudo experimental em ratos / Metabolic evaluation of ischemic and reperfusion brain injury following bilateral occlusion of common carotid arteries: an experimental study in rats

OBJETIVO: Caracterizar as alterações no metabolismo energético após isquemia/reperfusão cerebral através de um modelo experimental de isquemia global reversível por simples oclusão das artérias carótidas comuns (ACCs) em ratos da linhagem Wistar. MÉTODOS: Quarenta e oito ratos Wistar machos foram distribuídos aleatoriamente em dois grupos (C - Controle; T - Teste) e cada um deles redistribuídos em quatro tempos de estudos. Após oclusão bilateral das ACCs por 30min, permitiu-se reperfusão aos animais do grupo T nos tempos 0, 5, 10 e 15min. Foram coletadas amostras de tecido cerebral e sangue arterial sistêmico e quantificados os metabólitos D-glicose (GLI), piruvato (PRV), lactato (LCT) e adenosina trifosfato (ATP). RESULTADOS: Observou-se aumento nos níveis sangüíneos de GLI e PRV de, respectivamente, 85,00 por cento (p<0,05) e 51,72 por cento (p<0,01) aos 5min de reperfusão, refletindo uma resposta sistêmica à lesão isquêmica cerebral. O LCT cerebral manteve-se estável, apesar da redução de 52,66 por cento (p<0,05) na concentração sanguínea aos 15min de reperfusão. As concentrações cerebrais de ATP caíram 85,40 por cento (p<0,05) após isquemia, seguindo-se aumento de 3.033,40 por cento (p<0,05) aos 5min de reperfusão, evidenciando a retomada da respiração celular via cadeia fosforilativa. CONCLUSÕES: O modelo experimental proposto produziu isquemia global transitória parcial, com repercussão sistêmica. As maiores alterações metabólicas foram verificadas após os primeiros minutos de reperfusão, tipificando a lesão de reperfusão. Tais constatações mostram sua utilidade como ferramenta no estudo da fisiopatologia e de recursos terapêuticos da doença cerebrovascular isquêmica.